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技術(shù)文章

  • 2024

    11-21
    IHC未染色或無(wú)信號(hào)原因分析

    IHC未染色或無(wú)信號(hào)的原因:一、?抗體問(wèn)題?:抗體與一抗或二抗不兼容、抗體濃度不合適、抗體失效或儲(chǔ)存不當(dāng)?shù)榷紩?huì)導(dǎo)致無(wú)染色。例如,使用抗一抗種屬來(lái)源的二抗,確認(rèn)二抗是否識(shí)別一抗的亞型;使用更高濃度的抗體或延長(zhǎng)孵育時(shí)間;設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,確保抗體仍然有效?。二、?抗原修復(fù)不足?:固定步驟可能會(huì)改變抗體識(shí)別的抗原表位,導(dǎo)致抗原修復(fù)不足。使用微波或壓力鍋進(jìn)行抗原修復(fù),確保使用新鮮配置的修復(fù)液?。三、?樣本處理不當(dāng)?:樣本存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、切片制備不當(dāng)(如脫蠟不ce底)、組織切片干片等都會(huì)影響...

  • 2024

    11-21
    蛋白芯片是什么?

    一、蛋白芯片簡(jiǎn)介?蛋白芯片?是一種高通量的蛋白質(zhì)功能分析檢測(cè)技術(shù),主要用于監(jiān)測(cè)蛋白質(zhì)之間的相互作用。其基本原理是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于載體上,然后利用標(biāo)記了特定熒光物質(zhì)的抗體與芯片上的蛋白質(zhì)結(jié)合,通過(guò)熒光強(qiáng)度分析蛋白質(zhì)的表達(dá)數(shù)量和相互作用關(guān)系?。二、蛋白芯片的工作原理蛋白芯片通過(guò)將已知的蛋白質(zhì)分子固定在固相載體上,然后捕獲與之特異性結(jié)合的待測(cè)蛋白質(zhì)。這些待測(cè)蛋白質(zhì)可能存在于血清、血漿、尿液等生物樣本中。通過(guò)洗滌和純化步驟后,利用熒光掃描儀或激光共聚掃描技術(shù)測(cè)定各點(diǎn)的熒光強(qiáng)度...

  • 2024

    11-20
    如何提取細(xì)胞核蛋白?

    本文介紹一下用勻漿器研磨法提取貼壁細(xì)胞核蛋白的具體操作。一、前期準(zhǔn)備1、臺(tái)盼藍(lán)染液:取臺(tái)盼藍(lán)粉劑,將其溶解在10mL的雙蒸水當(dāng)中配制成質(zhì)量體積比為4%(4%w/v)的臺(tái)盼藍(lán)母液。在使用時(shí),利用PBS緩沖液將母液稀釋10倍,使其濃度達(dá)到0.4%,之后再與細(xì)胞懸液混合均勻。2、BufferA:包含10mmol/L的HEPES(在4℃下pH值為7.9)、1.5mmol/L的氯化鎂、10mmol/L的KCL、0.5mmol/L的二硫蘇糖醇(DTT)。若擔(dān)心漿蛋白降解會(huì)對(duì)核蛋白產(chǎn)生影響...

  • 2024

    11-19
    細(xì)胞凋亡的檢測(cè)

    一、光學(xué)顯微鏡觀(guān)察凋亡細(xì)胞的主要特征為核染色質(zhì)致密深染,形成致密質(zhì)塊,有時(shí)可碎裂。檢測(cè)方法:細(xì)胞涂片或組織石蠟切片作HE染色或Giemsa染色,在高倍物鏡下觀(guān)察凋亡細(xì)胞的形態(tài)改變,結(jié)合顯微測(cè)量工具可作凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)。二、視頻時(shí)差顯微技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中常用,通過(guò)相差顯微鏡可動(dòng)態(tài)觀(guān)察細(xì)胞凋亡的變化過(guò)程,尤其是觀(guān)察細(xì)胞表和外形的變化。檢測(cè)方法:收集2×10^5細(xì)胞/ml培養(yǎng)的細(xì)胞,置于多孔培養(yǎng)板,加入凋亡誘導(dǎo)劑,在帶有自動(dòng)攝像裝置的相差顯微鏡下觀(guān)察凋亡細(xì)胞的動(dòng)態(tài)改變,每隔1分鐘作序列攝影...

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